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吖啶酯(NSP-SA-NHS)CAS:199293-83-9和相關化合物已被證明是非常有優(yōu)勢的化學發(fā)光標記物,穩(wěn)定性,活性和敏感性超過了那些放射性同位素。在堿性條件下,NHS將會離去,吖啶酯將會以一個穩(wěn)定的酰胺鍵與蛋白質結合形成吖啶化合物。反應完成后,多余的吖啶鹽通過脫鹽柱除去。在存在堿性過氧化氫,吖啶標記的蛋白不需要酶催化可自行發(fā)光。加入激發(fā)試劑后,體系立即釋放光子,可以用430nm標準光度計
化學發(fā)光試劑已經由最初的魯米諾、異魯米諾試劑,發(fā)展到光澤精、吖啶酯、AMPPD以及三聯(lián)吡啶釕電化學發(fā)光試劑,技術上已經有了重大飛躍,在體外診斷技術中的占比已達到50%。化學發(fā)光免疫分析技術發(fā)展迅速,其基本的原理都是類似的。 化學發(fā)光免疫分析定義 反應體系中的某種物質的分子(如魯米諾、吖啶酯),包括反應物、產物、中間體或熒光物質,吸收了反應所釋放的能量而有基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài),然后再次回到基態(tài)時,會將能
蛋白質的結構和功能需要在合適的pH值環(huán)境中才能維持,因此在蛋白的制備及純化過程中,生物緩沖液的選擇非常重要,只有合適的緩沖液才能保證蛋白的活性和結構穩(wěn)定。 蛋白純化過程緩沖液作用 用于蛋白純化的緩沖劑有很多種,在維持體系的pH同時,要保證蛋白在純化過程中不能失活,或者是盡量減少蛋白失活的量,在蛋白純化的每一個步驟中都要保持蛋白的可溶性和活性。 蛋白純化緩沖液要求 蛋白純化過程中的緩沖液既要防止蛋白
吖啶酯化學發(fā)光分析CLIA是目前市場前景非常好的免疫分析方法,管式化學發(fā)光磁珠法中通常會用到鏈霉親和素和生物素,這里介紹CLIA中鏈霉親和素其作用。 吖啶酯的化學發(fā)光與魯米諾不一樣,魯米諾是長光型,可長時間發(fā)光,而吖啶酯屬于閃光性,發(fā)光時間短發(fā)光迅速,通常只有數秒。吖啶酯體系在堿性條件下加入激發(fā)劑過氧化氫0.4s后發(fā)射光強度達到最大,半衰期為0.9s,2s內發(fā)光基本結束,可以實現快速檢測。吖啶酯與
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